Aplicação de L-asparaginase de Cladosporium subuliforme na redução dos níveis de acrilamida e apoptose de células tumorais
Palavras-chave
Cladosporium subuliforme, L-asparaginase, acrilamida, modelo de alimento, células cancerosas
Grupo de pesquisa CNPq certificado pela UFV
Produção e Caracterização de Enzimas de Interesse Biotecnológico
Área de conhecimento (CNPq)
2.08.00.00-2 - Ciências Biológicas - Bioquímica -
Linha de pesquisa
Bioquímica e biotecnologia industrial
Resumo dos objetivos
A L-asparaginase (L-ASNase) catalisa a hidrólise do aminoácido L-asparagina, gerando ácido aspártico e amônia, sendo aplicada na indústria de alimentos para
reduzir acrilamida, uma substância classificada como provável carcinógeno humano, sendo formada pela reação de Maillard em alimentos ricos em açúcar redutor e asparagina, processados em alta temperatura. A L-ASNase pode também ser aplicada no setor clínico para induzir a apoptose de células tumorais ao esgotar a asparagina exógena que é essencial para essas células. Segundo a literatura, a L-ASNase pode ser obtida de diversos organismos, com os microrganismos destacando-se na sua produção. No entanto, L-ASNases bacterianas podem causar efeitos indesejados no organismo humano, e assim, os fungos filamentosos vem se mostrando como uma potencial fonte para obtenção dessa enzima. Assim, o objetivo deste projeto é produzir, purificar e aplicar L-SNase do fungo Cladosporium subuliforme em modelo alimentar para redução de acrilamida. Além disso, pretende-se avaliar o efeito citotóxico da enzima em células cancerígenas, visando seu uso no tratamento de câncer. Para isso, o fungo será cultivado em meio apropriado para a produção da enzima, que será purificada por cromatografia líquida de alto desempenho (FPLC). A L-ASNase purificada será testada em modelo alimentar para avaliar sua capacidade de reduzir os níveis de acrilamida, sendo padronizadas as condições do ensaio de formação da substância a partir de soluções de L-asparagina, amido e glicose, além da padronização no tempo de reação para formação da acrilamida. A quantificação de acrilamida será realizada por HPLC. Em seguida, a L-ASNase purificada será aplicada ao modelo de alimento para avaliação de sua eficiência na redução dos teores de acrilamida. Além disso, serão feitos ensaios para avaliar o efeito citotóxico da L-ASNase em diferentes linhagens celulares cancerígenas, determinando a concentração inibitória média no crescimento celular
Local de execução do projeto
BIOAGRO
Data de início
01/08/2023
Término previsto
Projeto envolve acesso à biodiversidade brasileira
não
Projeto envolve acesso ao conhecimento tradicional associado à biodiversidade brasileira